法医学杂志 ›› 2009, Vol. 0 ›› Issue (1): 33-36.
任广睦;刘季;王英元;
REN GUANG-MU1, LIU JI2, WANG YING-YUAN1 (1. SCHOOL OF FORENSIC MEDICINE, SHANXI MEDICAL UNIVERSITY, TAIYUAN 030001, CHINA; 2. TRAFFIC POLICE OF GUANGZHOU PUBLIC SECURITY BUREAU, GUANGZHOU 510640, CHINA)
摘要: 目的研究实时荧光定量RT-PCR方法检测死亡大鼠管家基因mRNA时序性降解的可行性,为死亡时间(postmortem interval,PMI)推断寻找新的研究手段。方法应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术,检测死后不同时间大鼠脑和脾中管家基因GAPDH mRNA及β-actin mRNA的水平,结果用循环阈值(简称Ct值)表示,分析死后经过时间与Ct值的线性关系,并建立死亡时间推断回归方程。结果GAPDH mRNA和β-actin mRNA的Ct值均与PMI之间存在显著的相关性。结论SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR在定量分析mRNA降解的研究中是一个较理想的技术手段。选用管家基因作为PMI推断的研究对象,可在法医检案中消除其他基因因为个体差异带来的误差,更具实用性。Ct值作为动态监测机体死后不同时间点的客观指标,与死后不同时间点的线性关系良好,推断死后经过时间尤其是晚期死亡时间较为理想。