采用LC-HRMS分析米氮平在人肝微粒体中的体外代谢产物

doi:10.12116/j.issn.1004-5619.2024.340606

摘要/Abstract

摘要：

目的建立并优化人肝微粒体体外温孵体系，研究米氮平的体外代谢产物及其可能的代谢途径。方法选择米氮平的3种主要代谢产物进行肝微粒体温孵条件优化，采用液相色谱-高分辨质谱联用仪进行分析，鉴定米氮平的体外代谢产物和代谢途径。结果在体外肝微粒体温孵实验中发现并鉴定了10个代谢产物，包括9个Ⅰ相代谢产物和1个Ⅱ相代谢产物，其中包含5个新的代谢产物，1条新的代谢途径。参与Ⅰ相代谢的途径包括氮去甲基化、羟基化、氧化、还原等，Ⅱ相生物转化代谢产物主要由葡萄糖醛酸化反应产生。结论本研究建立的肝微粒体体外温孵体系中发现的代谢产物与文献报道的米氮平主要代谢产物一致，均为N-去甲米氮平、8-羟基米氮平和米氮平氮氧化物，研究结果可为米氮平案件的确认提供依据，也为其他物质代谢产物的研究提供了参考。

关键词: 法医学, 毒物分析, 米氮平, 人肝微粒体, 代谢产物, 代谢途径, 液相色谱-高分辨质谱法（LC-HRMS）

Abstract:

Objective To establish and optimize an in vitro incubation system with human liver microsomes and investigate the in vitro metabolites and possible metabolic pathways of mirtazapine. Methods Three major metabolites of mirtazapine were selected to optimize the incubation conditions of liver microsomes. The metabolites of mirtazapine were analyzed by liquid chromatography-high resolution mass spectrometry （LC-HRMS） to identify the in vitro metabolites and metabolic pathways of mirtazapine. Results Ten metabolites, including nine phase Ⅰ metabolites and one phase Ⅱ metabolite, were identified in the in vitro liver microsome incubation. Among them, five new metabolites and one new metabolic pathway were discovered. The pathways involved in phase Ⅰ metabolic included methylation, hydroxylation, oxidation, reduction, etc., while the phase Ⅱ biotransformation was mainly glucuronidation. Conclusion The metabolites discovered in this study are consistent with the main metabolites of mirtazapine reported in literature, which are N-desmethylmetazapine, 8-hydroxy mirtazapine and mirtazapine-N-oxide. The results can provide basis for the confirmation of mirtazapine cases and provide reference for the study of other substances.

Key words: forensic medicine, toxicological analysis, mirtazapine, human liver microsome, metabolite, metabolic pathway, liquid chromatography-high resolution mass spectrometry （LC-HRMS）

中图分类号:

张瑛, 张文芳, 徐多麒, 覃仕扬, 杨士云, 乔静. 采用LC-HRMS分析米氮平在人肝微粒体中的体外代谢产物[J]. 法医学杂志, 2024, 40(6): 569-574.

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图/表 8

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化合物	化学式	［M+H］⁺质量数			保留时间/min	二级特征碎片离子（m/z）
化合物	化学式	理论质量数（m/z）	实测质量数（m/z）	误差/×10^-6	保留时间/min	二级特征碎片离子（m/z）
米氮平	C₁₇H₂₀N₃⁺	266.165 17	266.164 79	1.43	3.71	209，195，72
M-252（N-去甲米氮平）	C₁₆H₁₈N₃⁺	252.149 52	252.149 12	1.59	3.64	235，209，195
M-282A（8-羟基米氮平）	C₁₇H₂₀N₃O⁺	282.160 61	282.159 42	-1.84	3.37	225，211，166，72
M-282B（米氮平氮氧化物）	C₁₇H₂₀N₃O⁺	282.160 09	282.159 94	0.53	3.82	264，208，195
M-268	C₁₆H₁₈N₃O⁺	268.144 44	268.143 86	4.10	3.74	250，225，211
M-280A	C₁₇H₁₈N₃O⁺	280.144 44	280.144 23	0.75	3.20	252，195，58
M-280B	C₁₇H₁₈N₃O⁺	280.144 44	280.144 20	0.86	3.86	252，209，195
M-280C	C₁₇H₁₈N₃O⁺	280.144 44	280.144 17	0.96	4.25	252，209，195，58
M-458	C₂₃H₂₈N₃O₇⁺	458.192 18	458.191 77	0.90	1.84	282，211，72
M-296	C₁₇H₁₈N₃O₂⁺	296.139 35	296.139 28	1.35	3.54	278，268，250，211，58
M-298	C₁₇H₂₀N₃O₂⁺	298.155 00	298.154 88	0.42	3.32	280，211，70

化合物	化学式	［M+H］⁺质量数			保留时间/min	二级特征碎片离子（m/z）
化合物	化学式	理论质量数（m/z）	实测质量数（m/z）	误差/×10^-6	保留时间/min	二级特征碎片离子（m/z）
米氮平	C₁₇H₂₀N₃⁺	266.165 17	266.164 79	1.43	3.71	209，195，72
M-252（N-去甲米氮平）	C₁₆H₁₈N₃⁺	252.149 52	252.149 12	1.59	3.64	235，209，195
M-282A（8-羟基米氮平）	C₁₇H₂₀N₃O⁺	282.160 61	282.159 42	-1.84	3.37	225，211，166，72
M-282B（米氮平氮氧化物）	C₁₇H₂₀N₃O⁺	282.160 09	282.159 94	0.53	3.82	264，208，195
M-268	C₁₆H₁₈N₃O⁺	268.144 44	268.143 86	4.10	3.74	250，225，211
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M-298	C₁₇H₂₀N₃O₂⁺	298.155 00	298.154 88	0.42	3.32	280，211，70

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