目的 采用微生物组学分析技术，研究乙醇联合一氧化碳（carbon monoxide，CO）中毒大鼠死后肠道细菌群落结构的演变规律，并探讨该变化与死亡时间（postmortem interval，PMI）之间的联系。 方法 建立CO中毒致死、乙醇暴露后CO中毒致死、单纯乙醇暴露、空白对照组的动物模型，分别于大鼠死后0、1、3、7、14 d取直肠标本。采用高通量测序技术对微生物16S rRNA基因进行测序，分析细菌群落的多样性、相对丰度和差异性，并利用随机森林算法构建基于细菌群落演变规律预测PMI的模型。 结果 各组大鼠死后14 d内肠道细菌群落的组成在门和属水平均发生改变。基于细菌群落特征的PMI预测模型在各组中均表现出良好的预测性能，CO中毒致死、乙醇暴露后CO中毒致死、单纯乙醇暴露、空白对照组的模型拟合度分别为0.60、0.59、0.61和0.60，平均误差均为1 d左右。 结论 CO中毒、乙醇联合CO中毒和乙醇摄入均会对大鼠尸体细菌群落结构的演变规律产生影响。在法医学实践中，针对此类特定中毒案例进行PMI推断时，建议采用为其专门构建的预测模型，以有效提高推断的准确性。

目的 利用生物信息学技术筛选急性心肌缺血（acute myocardial ischemia，AMI）生物标志物。 方法 利用基因表达综合（Gene Expression Omnibus，GEO）数据库，获取心肌缺血相关的数据集（GSE415、GSE775、GSE4648、GSE19875、GSE8322），分为AMI数据集（20个对照样本和5个AMI样本）和心肌缺血数据集（16个对照样本和18个心肌缺血样本）。使用加权基因共表达网络分析（weighted gene co-expression network analysis，WGCNA）、最小绝对收缩和选择算子（least absolute shrinkage and selection operator，LASSO）回归及受试者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，筛选出潜在的生物标志物。建立小鼠心肌缺血模型（心肌缺血15 min和心肌缺血60 min），通过实时荧光定量PCR技术验证潜在生物标志物是否可以作为辅助推断AMI的生物标志物。 结果 鉴定AMI最精准的指标是核因子κB抑制蛋白α（inhibitor of nuclear factor-κB alpha，IκBα；AUC=0.91）；鉴定心肌缺血较为精准的指标是B细胞易位基因2（B cell translocation gene 2，BTG2；AUC=0.78）和囊泡转运蛋白USE1（AUC=0.77）。验证结果显示，IκBα在对照组、心肌缺血组和AMI组的表达量差异均有统计学意义（P<0.05）；BTG2在心肌缺血组的表达量最高（P<0.05）；USE1在3个组别中差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论 IκBα可用于鉴定AMI和心肌缺血，BTG2可以作为辅助诊断心肌缺血的生物学指标。

目的 探究线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）同质性和异质性变异在四代母系家系中的遗传特征。 方法 采集4个四代母系家系23例个体的口腔拭子并提取DNA，构建mtDNA全基因组文库后，应用Ion S5 XL测序系统测序，并进行序列比对和变异分析。 结果 通过对mtDNA全基因组测序数据进行质控和分析，获得的测序覆盖度高达99.73%，平均测序深度为3 458×。23例的mtDNA全基因组序列中，共观察到939个遗传变异，其中883个为点突变，36个为插入缺失变异，20个为异质性变异。同一母系家系个体的mtDNA序列未发现同质性点突变的差异，但存在不同的点异质性（point heteroplasmy，PHP）。 结论 线粒体的PHP变异在遗传过程中可发生变化，将异质性的差异作为排除同一母系来源的指标存在风险。在进行mtDNA序列比对时，如在两个单倍型一致的样本中观察到相同的PHP，且主要等位基因及次要等位基因一致，可作为认定两样本为同一母系来源的增强性证据。

目的 建立毛发中21种依托咪酯类成分及依托咪酯酸的定性定量分析方法，探讨其在实际案件中的应用价值。 方法 毛发样本经冷冻湿法研磨提取，上清液经0.22 µm有机滤膜过滤，色谱柱选用Kinetex^® Biphenyl（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），流动相为5 mmol/L乙酸铵水溶液和甲醇，在15 min内进行梯度洗脱，UPLC-MS/MS法使用电喷雾离子源在正离子模式下采集数据，并进行方法学验证。 结果 毛发中21种依托咪酯类成分及依托咪酯酸的分离度较好，特别是3组同分异构体中的8个化合物［丙帕酯与异丙帕酯，丁托咪酯、仲丁咪酯、异丁咪酯与叔丁咪酯，1-甲氧羰基-2-甲基丙-2-基1-（1-苯乙基）-1H-咪唑-5-羧酸酯与1-甲氧羰基-2-甲基丙基1-（1-苯乙基）-1H-咪唑-5-羧酸酯］均得到有效分离，检出限为0.005~0.020 ng/mg，以0.05 ng/mg为定量下限，在定量线性范围内线性关系良好（r>0.999）。所建立方法的选择性、准确度与精密度均达到验证要求，基质效应、提取回收率在不同质量分数水平下重现性良好，处理后毛发样品在4 ℃下存放36 h定量结果稳定。实践应用结果表明，可在滥用者毛发中检出依托咪酯、美托咪酯、异丙帕酯、仲丁咪酯、异丁咪酯、三氟乙咪酯、甲氧羰基环丙咪酯及代谢物依托咪酯酸，但依托咪酯酸含量较低。 结论 本研究建立的方法操作简便、定量准确，可同时测定毛发中依托咪酯酸、已列管的13种依托咪酯类物质及尚未列管的8种潜在衍生物，涵盖酯侧链、苯环及咪唑环等位点的烷基、烷氧基、烷氧羰基、卤素及巯基取代类型，能够为打击依托咪酯类物质滥用提供技术支持。

目的 研究无对照品时未知结构合成大麻素的定性分析策略。 方法 采用柱层析对可疑样品进行纯化，得到高纯度制备样品。综合利用GC-MS、超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry，UPLC-QTOF-MS）、核磁共振波谱（nuclear magnetic resonance spectroscopy，NMR）对制备样品进行分析，对比UPLC-QTOF-MS的碰撞诱导解离（collision-induced dissociation，CID）和电子活化解离（electron-activated dissociation，EAD）两种碎裂模式的差异，最终确证结构。 结果 通过柱层析纯化得到129.9 mg高纯度制备样品，利用GC-MS、UPLC-QTOF-MS和NMR综合分析，确证未知结构合成大麻素为N-（金刚烷-1-基）-2-[1-（4-氟苄基）-1H-吲哚-3-基]乙酰胺，英文简称AFUBIATA。通过比较CID和EAD两种裂解模式可知，EAD模式下可得到更丰富的碎片离子信息，有助于未知结构物质的解析。 结论 通过柱层析纯化可获得高纯度样品，综合利用GC-MS、UPLC-QTOF-MS和NMR信息，可实现未知合成大麻素的结构解析。

目的 探究创伤性硬脑膜下积液（traumatic subdural hydroma，TSH）致精神伤残的相关风险因素。 方法 回顾性分析安徽皖医司法鉴定中心和安徽华泰司法鉴定所2007—2023年进行法医学鉴定的162例单纯性TSH案例资料，依据《人体损伤致残程度分级》评估精神伤残。按照性别、年龄、文化程度、积液范围、积液部位及积液时间进行分组，采用t检验或单因素方差分析比较各组TSH伤残评分差异，采用Spearman相关分析评估伤残评分与各变量之间的相关性，并采用多元线性回归分析筛选影响因素，同时构建受试者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析影响因素对精神伤残的预测效能。 结果 （1）TSH伤残评分与年龄、积液范围及积液时间呈负相关；（2）多元线性回归分析结果显示积液时间对TSH伤残评分影响最大，其次是积液范围；（3）当TSH伤残评分≤10分时，ROC曲线分析显示积液范围的临界值为>2个部位，积液时间的临界值为>51 d；当TSH伤残评分≤9分时，积液范围的临界值为>2个部位，积液时间的临界值为>78 d；当TSH伤残评分≤8分时，积液范围的临界值为>2个部位，积液时间的临界值为>97 d。 结论 单纯性TSH后果的危险因素是积液时间和积液范围。积液时间对TSH所致精神伤残的影响高于积液范围，且预测稳定性优于积液范围；积液时间>51 d和积液范围>2个部位的TSH多构成精神伤残。

目的 利用mini-STR与八色荧光标记技术，建立八色荧光复合扩增体系，并评价其在降解样本检测中的应用价值。 方法 采用八色荧光标记技术，对26个基因座（D22S1045、D13S317、CSF1PO、D2S441、D10S1248、TPOX、D16S539、D5S818、Penta D、TH01、D2S1338、Penta E、rs2032678、Amelogenin、D19S433、D21S11、D6S1043、D8S1179、vWA、D7S820、D1S1656、DYS391、D18S51、D12S391、D3S1358、FGA）进行复合扩增体系的构建，并对所构建的复合扩增体系进行特异性、灵敏度、准确性及降解样本检测能力等方面性能的评价与测试。 结果 开发出一款包含26个基因座的八色荧光复合扩增体系，所有基因座扩增子都在310 bp以内，具有特异性好、灵敏度高、分型准确等优点，在降解样本的检测中具有良好的效果。 结论 mini-STR结合八色荧光构建的复合扩增体系对降解样本的检测具有良好应用价值，可以用于法医学实践。

血迹可为案件侦查提供关键信息，是重要的法医物证。在犯罪现场发现潜在血迹至关重要，可以使用化学、物理、生物等手段进行搜寻。生物搜寻以警犬为典型代表，使用犬类搜寻犯罪现场潜在血迹是一种实时、快速、有效、无损的检测方法，能够适应多场景检测工作的需要。本文通过梳理警犬血迹搜索技术的发展史，总结警犬血迹搜索的气味基础，从使用警犬搜索微量血迹、稀释血迹、清洗血迹、区分人血与动物血等角度，综述法医调查中警犬血迹搜索技术的使用现状，并对该技术的发展进行展望，以期为警犬血迹搜索相关研究提供参考。

DNA鉴定技术被广泛应用于法医学个体识别及亲缘关系判定等方面。然而，火场高温环境常导致DNA严重破坏，影响其证据价值。近年来研究发现，特定核酸分子基于自身独特的生物学特性，在高温降解样本中展现出显著优势。核基因组DNA中的Y染色体STR（Y-chromosome STR，Y-STR）与常染色体STR相比，部分基因座片段更短，在高温引发的DNA链随机断裂过程中，应用Y-STR可有效降低断裂位点落入核心重复区的概率，显著提高分型成功率；线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）因具有较高拷贝数及双链闭环结构，在高温条件下仍保持较高检出率；微RNA（microRNA，miRNA）虽无法用于个体识别，但凭借其稳定性在高温环境中留存率较高，为死亡时间推断提供了新型分子工具。本文系统梳理了高温环境下核基因组DNA和mtDNA的分型效率及其影响因素，总结了高温对组织miRNA表达谱的调控作用，同时，整合了核酸的热损伤机制及诱因，以期为提升火场核酸物证的证据价值提供参考。

吲哚和吲唑酰胺类合成大麻素出现以来，引发了严重的公共卫生和社会问题。此类物质结构多样，在体内外代谢广泛且迅速，原形在生物检材中无法检出，且产生各种有害作用的确切机制也尚未完全了解，给毒情筛查与毒理学案例分析带来挑战。由于吲哚和吲唑酰胺类合成大麻素有着相似的结构和理化性质，本文基于构型对近年来此类合成大麻素的研究进行文献调研，汇总其药效学、药物代谢动力学（简称“药动学”）等研究成果，以期为法医鉴定和该类物品监管提供参考。

一氧化二氮，又称笑气，是传统毒品的替代物质之一。笑气滥用可导致认知功能改变和记忆损害，短时间内大量吸食可能导致机体缺氧，严重时可致突然窒息死亡。本文基于国内外相关研究，系统梳理笑气的药理毒理作用、毒性数据、中毒症状、体内过程以及典型案例的毒物分析数据，以期为法医学鉴定提供参考。